نمک فسفات بافری PBS
نمک فسفات بافری(PBS) یک محلول بافری است که به طور معمول در تحقیقات زیستی مورد استفاده قرار میگیرد. این یک محلول نمکی شامل سدیم کلرید، سدیم فسفات و در برخی فرمول ها، پتاسیم کلرید و پتاسیم فسفات است. این بافر کمک میکند تا pH ثابت نگه داشته شود. معمولا غلظت یون و مواد درون آن با داخل بدن شبیه است. PBS 1X مخفف Phosphate Buffered Saline 1X است که به فارسی به آن محلول نمکی بافر فسفات گفته میشود. این محلول یک محلول ایزوتونیک است که به طور گسترده در زیستشناسی سلولی و مولکولی استفاده میشود. PBS 1X به دلیل شباهت به محیط فیزیولوژیکی بدن، برای سلولها غیرسمی است و به حفظ pH و فشار اسمزی محیط کمک میکند.
اجزای تشکیل دهنده PBS 1X
- نمکهای سدیم و پتاسیم: این نمکها به ایجاد فشار اسمزی مناسب برای سلولها کمک میکنند.
- فسفات سدیم: این ترکیب به عنوان یک بافر عمل میکند و pH محلول را در محدوده فیزیولوژیکی ثابت نگه میدارد.
انواع PBS 1X
- PBS 1X با کلسیم و منیزیم (+/+): این نوع PBS برای کشت سلولهایی که به کلسیم و منیزیم نیاز دارند (مانند سلولهای چسبنده) استفاده میشود.
- PBS 1X بدون کلسیم و منیزیم (-/-): این نوع PBS برای جداسازی سلولها از سطح کشت استفاده میشود، زیرا کلسیم و منیزیم میتوانند به چسبندگی سلولها به سطح کمک کنند.
کاربرد های PBS بافر (فسفات-بافر شوره)
کشت سلولی
بافر PBS 1X برای شستشوی سلولها در کشت سلولی استفاده میشود، زیرا میتواند کمک کند که محیط باقیمانده و سایر آلایندهها را حذف کند.
برچسبگذاری و تصفیه آنتی بادی
بافر PBS 1X به عنوان بافر شکست آنتی بادی استفاده میشود، زیرا میتواند استحکام و فعالیت آنها را حفظ کند. همچنین، در فرآیند تصفیه، برای شستشو و الوت آنتی بادی نیز استفاده میشود.
ایمونوهیستوشیمی (IHC)
بافر PBS به عنوان بافر شستشو در پروتکلهای IHC برای حذف آنتی بادیها و سایر مواد شیمیایی استفاده میشود.
جداسازی DNA و RNA
بافر PBS در فرآیند جداسازی DNA و RNA به عنوان بافر شستشو استفاده میشود تا آلایندهها و یونهای نمکی باقیمانده را حذف کند.
جداسازی و تصفیه پروتئین
بافر PBS برای شستشو در پروتکلهای جداسازی و تصفیه پروتئین استفاده میشود تا به حذف آلایندهها کمک کند و استحکام پروتئین را حفظ کند.
آزمایش آنزیمی
بافر PBS به عنوان بافر واکنش در بسیاری از آزمایشهای آنزیمی استفاده میشود، زیرا میتواند به حفظ pH و قدرت یونی مورد نیاز برای واکنش کمک کند.
کاربردهای عمومی PBS 1X
- شستشوی سلولها: قبل از انجام هرگونه آزمایش روی سلولها، شستشو با PBS 1X برای حذف بقایای محیط کشت و سایر ناخالصیها ضروری است.
- رقیقسازی نمونهها: PBS 1X برای رقیق کردن نمونههای بیولوژیکی مانند آنتیبادیها، پروتئینها و سلولها استفاده میشود.
- انتقال سلولها: هنگام انتقال سلولها از یک ظرف به ظرف دیگر، استفاده از PBS 1X به حفظ زندهمانی سلولها کمک میکند.
- تهیهی محلولهای رقیق از معرفها: بسیاری از معرفها را میتوان با استفاده از PBS 1X رقیق کرد.
- حفظ نمونهها: PBS 1X میتواند برای نگهداری کوتاهمدت نمونههای بیولوژیکی در یخچال استفاده شود.
مزایای PBS 1X
- ثبات pH: مهمترین ویژگی PBS، توانایی آن در حفظ pH ثابت است. این ویژگی به ویژه در آزمایشهایی که تغییرات pH میتواند بر نتایج تأثیر بگذارد، بسیار حیاتی است.
- ایزوتونیک بودن: PBS با محیط سلولی ایزوتونیک است، به این معنی که غلظت املاح آن مشابه غلظت املاح داخل سلول است. این ویژگی از آسیب دیدن سلولها در حین شستشو یا رقیقسازی جلوگیری میکند.
- عدم سمیت: PBS برای سلولها غیرسمی است و به همین دلیل در کشت سلولی و سایر روشهای مرتبط با سلولها به طور گسترده استفاده میشود.
- توانایی حفظ اسمولاریته: PBS میتواند اسمولاریته محلول را حفظ کند که این ویژگی برای بسیاری از آزمایشها، از جمله ایمونواسیها، ضروری است.
نکات مهم در استفاده از PBS 1X
- pH: pH مناسب PBS 7.4 است، اما بسته به کاربرد ممکن است pH کمی متفاوت باشد.
- استریل بودن: برای کاربردهای مرتبط با سلولها و میکروبیولوژی، استفاده از PBS استریل ضروری است.
- غلظت: PBS معمولاً به صورت 1X استفاده میشود، اما غلظتهای دیگر نیز ممکن است مورد استفاده قرار گیرد.
در مجموع، PBS 1X یک محلول بافر همه کاره است که در بسیاری از آزمایشگاههای زیستشناسی مورد استفاده قرار میگیرد. انتخاب نوع مناسب PBS و رعایت نکات ذکر شده، به اطمینان از موفقیت آزمایشها کمک میکند.
Reviews
There are no reviews yet.